LB自誘導培養(yǎng)基AIM原理知道少

自誘導培養(yǎng)基Auto Induction Medium（AIM），包含LB Broth (AIM)， 2x YT Broth (AIM)， Terrific Broth (AIM)， Super Broth (AIM)。通常，外源蛋白在細菌中表達時常使用IPTG誘導的啟動子，如Lac啟動子。當細胞密度達到理想值時，通過向培養(yǎng)基中加入IPTG的方法誘導蛋白表達。使用這個自動誘導培養(yǎng)基，不再需要監(jiān)測細胞密度和添加IPTG。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻止細菌利用α-乳糖，而被優(yōu)先代謝，促進高密度生長。一旦培養(yǎng)基中的葡萄糖被耗盡（通常發(fā)生在對數(shù)期的后期），乳糖被?-半乳糖苷酶轉(zhuǎn)換成異乳糖（葡萄糖-1,6-半乳糖），而后者作為IPTG誘導型啟動子的誘導劑，引起乳糖阻遏子從與DNA結(jié)合的位點上釋放，啟動重組蛋白的表達。對于DE3基因型的E.coli中，異乳糖使T7lac啟動子去阻遏，并誘導lacUV5啟動子表達T7 RNA聚合酶。通過這種方式，在細菌培養(yǎng)物生長到某一特定點時蛋白表達自發(fā)開始，省掉了監(jiān)測細胞密度（OD600）和添加IPTG這兩個步驟。與傳統(tǒng)IPTG誘導的蛋白表達過程相比，使用自動誘導培養(yǎng)基極大地方便和簡化了試驗流程。

LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱，生化分子實驗中一般用該培養(yǎng)基來預培養(yǎng)菌種，使菌種成倍擴增，達到使用要求。也可用于培養(yǎng)基因工程受體菌（大腸桿菌）。可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。LB一般被解釋為Luria-Bertani培養(yǎng)基，然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法，這個名字來源于英語的lysogeny broth，即溶菌肉湯。靶點科技常備LB Broth現(xiàn)貨，產(chǎn)品圖片如下：

自誘導培養(yǎng)基(lac啟動子)(Auto-induction Medium)產(chǎn)品及特點

本產(chǎn)品是在pET專用生長培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開發(fā)而成的,它利用E.coli自身對培養(yǎng) 基中碳源和能源的調(diào)控利用機制,實現(xiàn)外源蛋白在細菌達到飽和期后的自動誘發(fā)。

具有下列特點:

1. 不需添加任何IPTG或相關(guān)誘導物,節(jié)約成本。--無需IPTG

2. 免去了密切監(jiān)控菌液密度的過程,尤其適合大規(guī)模篩選 。--無需OD監(jiān)測

3. 細菌生長密度遠高于IPTG誘導表達系統(tǒng) 。--細菌密度高

4. 外源蛋白表達量遠遠高于IPTG誘導表達系統(tǒng)。--表達量高

5. 本產(chǎn)品即開即用,操作簡單 。--溶解即用

6. 與各種細胞培養(yǎng)容器兼容(如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)罐、深孔管、發(fā)酵罐等)。--兼容性好

過夜培養(yǎng)自動誘導細胞表達的培養(yǎng)基系統(tǒng)，培養(yǎng)基都可以大程度上提高pET系列和其它IPTG原核誘導表達系統(tǒng)在大腸桿菌中蛋白的表達量，其最大的方便之處在于使用這種培養(yǎng)基不需要對大腸桿菌的生長密度進行檢測。因為IPTG會對細胞存在毒性，因此使用了這種不含IPTG的自動誘導體系培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比可以使細胞數(shù)量和目的蛋白量都大大增加數(shù)倍。

這種培養(yǎng)基是基于F. William Studier博士的技術(shù)，使用了不同代謝成分提高細胞的生長密度，并自動誘導lac啟動子開始轉(zhuǎn)錄。Overnight Express Instant TB Medium培養(yǎng)基現(xiàn)在提供三種不同的成分。作為一種粉末裝TB培養(yǎng)基它可快速溶解在水中，并進行微波加熱和高壓滅菌處理。