腦巨噬細(xì)胞清除方案Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體巨噬細(xì)胞清除劑腦室注射

大腦周圍的免疫細(xì)胞——實質(zhì)邊界巨噬細(xì)胞(BAMs)，會影響廢物從大腦中清除的效率，而這種免疫細(xì)胞在老年小鼠、人和患有阿爾茨海默氏癥的小鼠中受損。中樞神經(jīng)系統(tǒng)小膠質(zhì)細(xì)胞的研究已經(jīng)十分廣泛，但血管周圍和軟腦膜中的巨噬細(xì)胞，即CNS相關(guān)巨噬細(xì)胞（central nervous system-associated macrophages，CAMs），其作用尚不明確。CAMs位于腦脊液中的血管旁，處于血液與腦實質(zhì)的交界處，具有清除細(xì)胞碎片和呈遞抗原的生理功能，它們在病理狀態(tài)下與炎癥反應(yīng)緊密相關(guān)。

腦中包含兩個主要的巨噬細(xì)胞群，即小膠質(zhì)細(xì)胞和邊界相關(guān)巨噬細(xì)胞 (BAMs)，各自在大腦穩(wěn)態(tài)和免疫防御中發(fā)揮著不同的作用。小膠質(zhì)細(xì)胞是腦中豐富的髓樣細(xì)胞群，在胚胎發(fā)生過程中卵黃囊 (YS) 造血期產(chǎn)生，并在E9.5-10.5滲入腦原基。BAMs位于腦中的硬腦膜、軟腦膜、血管周圍淋巴間隙（VR間隙）和脈絡(luò)叢等部位，也同樣源于YS祖細(xì)胞。雖然胚胎來源的血管周圍和硬膜下巨噬細(xì)胞隨時間推移表現(xiàn)穩(wěn)定，但脈絡(luò)叢和硬腦膜中的巨噬細(xì)胞在循環(huán)單核細(xì)胞的介導(dǎo)下會經(jīng)歷快速更新。

巨噬細(xì)胞是維持組織穩(wěn)態(tài)的重要角色。血管周圍和軟腦膜巨噬細(xì)胞位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）實質(zhì)附近CNS相關(guān)巨噬細(xì)胞（central nervous system-associated macrophages，CAMs），它們在CNS生理學(xué)中的作用尚未得到充分研究。鑒于它們與腦脊液（CSF）的持續(xù)相互作用和戰(zhàn)略定位，研究人員將這些細(xì)胞統(tǒng)稱為實質(zhì)邊界巨噬細(xì)胞(BAMs)。表達(dá)高水平CD163和LYVE1（清道夫受體蛋白）的實質(zhì)邊界巨噬細(xì)胞(BAMs)，與腦動脈樹密切相關(guān)，并表明LYVE1+BAMs調(diào)節(jié)驅(qū)動腦脊液流動的動脈運(yùn)動。

腦膜是位于腦組織的三層薄膜，免疫細(xì)胞密集分布其中，其產(chǎn)生的細(xì)胞因子可影響小鼠的行為。腦脊液中可以攜帶來自外周和腦膜的細(xì)胞因子，在整個腦實質(zhì)內(nèi)循環(huán)。血管周圍空間充滿腦脊液，構(gòu)成血管和中樞神經(jīng)系統(tǒng)實質(zhì)之間的界面。腦脊液沿著血管周圍空間流動，可穿過星形膠質(zhì)細(xì)胞腳板并流入大腦。腦脊液在大腦的流動可促進(jìn)腦膜免疫分子直接接觸腦細(xì)胞信號，促進(jìn)腦膜淋巴管、腦代謝產(chǎn)物的清除。

大腦髓系細(xì)胞由小膠質(zhì)巨噬細(xì)胞、軟腦膜和血管周圍巨噬細(xì)胞等組成，其中血管周圍和軟腦膜巨噬細(xì)胞統(tǒng)稱為實質(zhì)邊界巨噬細(xì)胞（BAMs）。BAM存在于沿著脈管系統(tǒng)的軟腦膜和血管周圍空間，可直接與腦脊液進(jìn)行接觸。

如何使用荷蘭liposoma品牌的巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除腦部的巨噬細(xì)胞？可以參考如下方案。
模型：中風(fēng)。腦缺血再灌注實驗(MCAO)。建議訂購Doccol（靶點科技）

研究變量：年齡。年輕（2個月）和年老（18個月）

注射方法：腦室注射

體積：10ul

年輕小鼠中，CAM被Clodronate Liposomes（CLO）清除后，對功能缺陷分布、缺血性損傷體積、再通率或出血轉(zhuǎn)化評分沒有影響。而老年小鼠中CAMs的耗竭惡化了整體前爪力量的功能缺陷以及缺血大腦控制的爪的功能缺陷。CAM被Clodronate Liposomes（CLO）清除后的老年小鼠大腦中中性粒細(xì)胞和CD4+和CD8+T細(xì)胞的滲透顯著增加。直到中風(fēng)后5天，CAMs的特異性耗竭仍然有效。此外，CD11b+CD45high細(xì)胞數(shù)量和吞噬性小膠質(zhì)細(xì)胞在CAM耗竭的老年小鼠中顯著增加。