貼壁細胞:
常見的成纖維細胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細胞等,這些都是需要貼壁生長的,即需要物理附著于基質(zhì)或細胞外基質(zhì)才能生長和繁殖,許多常見的原代和連續(xù)細胞系都是貼壁的。
貼壁細胞一般都來于體內(nèi)的實體組織,它們需要依附基質(zhì)固定在一個位置生長,因此為達到穩(wěn)定,其表面有著豐富的黏附受體,存在多種“黏附分子" 和 “細胞外基質(zhì)受體",常見比如整合素、鈣黏素等。在體外培養(yǎng)時,以上這些物質(zhì)能識別培養(yǎng)表面的帶電基團(培養(yǎng)耗材有電荷)或人工包被的ECM蛋白或多賴氨酸等。
懸浮細胞:
常見于血液中,它們經(jīng)常存在于流動的血液環(huán)境當中,常見如紅細胞、白細胞,還有淋巴液中的淋巴細胞(T細胞、NK細胞),它們在人體內(nèi)就需要隨著體液流動,才能到達發(fā)揮作用的部位。
懸浮細胞體外培養(yǎng)時往往需要外界力來提供動態(tài)環(huán)境,促進其生長繁殖,普遍是采用容器震蕩來模擬,一方面可以促使細胞更容易發(fā)生氣體交換,另外也讓液體養(yǎng)料均勻化。常用到的培養(yǎng)器具有搖瓶或生物反應器,與此同時,懸浮培養(yǎng)對血清的需求更低,甚至可以在沒有血清或低血清的條件下生長。
懸浮細胞則通常缺乏上述功能性黏附受體表達,要么這些分子的活性被抑制,甚至有些會具有抑制黏附的表面結(jié)構(gòu),如某些細胞表面覆蓋較厚的糖萼(多糖結(jié)構(gòu)),帶負電荷的多糖鏈可產(chǎn)生空間位阻和靜電斥力,防止細胞與基質(zhì)或其他細胞黏附。
細胞馴化:
工業(yè)生產(chǎn)中,常見將貼壁細胞馴化為懸浮細胞是生物制藥工業(yè)中的一項關(guān)鍵技術(shù),旨在實現(xiàn)大規(guī)模、高產(chǎn)量、低成本的生物制品生產(chǎn)?,F(xiàn)在商業(yè)中已成功馴化細胞有CHO、293T,這兩類細胞本身具有雙重生長特性,既可以貼壁生長,也可以懸浮生長,通過培養(yǎng)基和添加物誘導篩選可達到。
懸浮細胞固定:
為什么要固定?比如需要用懸浮細胞做免疫熒光;需要單層的懸浮細胞;需要均勻的刺激懸浮細胞等情況下,我們就期望懸浮細胞能像貼壁細胞一樣就好。傳統(tǒng)的方法就是涂片,甩片等各種手段,都不盡人意。靶點科技懸浮細胞固定免疫熒光專用玻片,有效的解決了這個痛點。簡單四步,再也不用談虎色變,望洋興嘆。
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